活化色谱柱的方式
2023-06-13 分类:百科
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活化步骤如下
1、在活化色谱柱前,应先用相关试剂冲洗液相系统的流路,确保无污染物残留。切换至封柱试剂(一般为甲醇或乙腈),置换流路内的试剂。
2.停泵,将分析柱的进液口连上系统,移除出液口的堵头,出液口不连上系统。倾斜放置色谱柱,使其出液口高于入液口。
3.以0.1ml/min的流速冲洗色谱柱约5分钟,切换至0.2ml/min的流速继续冲洗。观察色谱柱出液口,若连续出液,停泵,将色谱柱出液口接入液相系统。
4.以0.1ml/min的流速冲洗色谱柱,5分钟内将流速平稳提升至0.5ml/min继续冲洗色谱柱。
5.以0.5ml/min的流速冲洗色谱柱,期间观察压力与基线是否平稳,直到冲洗的总流量达到30个柱体积。
6.活化完成。
对于久置不用的类似型号色谱柱,再次使用前也可参考上述步骤进行活化。
活化色谱柱的方式
采用100%甲醇1mI/min冲洗60min,再换成流动相进行平衡如果流动相中含有缓冲盐,在换成流动相前,请使用过度流动相过渡后再换流动相平衡。
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